目的 检测微小RNA(miRNA,miR)-30b在胰腺癌干细胞(PCSC)中的表达并观察miR-30b对PCSC上皮-间质转化(EMT)及迁移侵袭能力的调控作用.方法 采用流式细胞仪分选胰腺导管腺癌(PDAC)细胞系PANC-1中CD24、CD44和EpCAM三阳性的PCSC,并检测胚胎干性基因情况;分析miR-30家族在PCSC和普通癌细胞的表达谱,筛选出差异表达最明显的成员;miR-30b mimic转染PCSC,检测EMT特征基因表达变化,Transwell检测miR-30b对PCSC迁移和侵袭能力的影响;再将miR-30b agomir转染PCSC后接种于裸鼠,研究miR-30b对PCSC成瘤能力的影响.结果 分选出的PCSC占PANC-1总数的4.52％～8.09％,Oct4和Nanog在mRNA及蛋白水平均显著高于PANC-1(P<0.001),miR-30b、c、d的表达水平显著下调,其中miR-30b最为显著.PCSC中miR-30b过表达后,E-钙黏蛋白显著上调(P<0.001),N-钙黏蛋白(P<0.001)、转录因子Snail(P<0.001)显著下调,而波形蛋白(vimentin)的表达无明显变化,Transwell实验显示受染后PCSC迁移和侵袭性均明显下降(P<0.001).体内实验中过表达miR-30b的PCSC注射的裸鼠成瘤体积、质量也显著低于对照组(P<0.01).结论胰腺癌细胞中CD24、CD44和EpCAM三阳性PCSC存在明显的干性特征.miR-30b能够逆转PCSC的EMT过程,降低其迁移和侵袭作用,同时抑制PCSC的成瘤性.

作者：郭青松；王鹏；黄龑；郭益冰；朱铭岩；熊益程

来源：中华医学杂志 2019 年 99卷 38期