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目的 构建肝细胞生长因子(HGF)mRNA定量标准,建立实时荧光定量(FQ)-PCR检测体系,探讨其检测淋巴瘤的应用价值.方法 提取总RNA,行逆转录(RT)-PCR,获HGF cDNA目标片段并构建重组质粒,作为定量标准.设计第二引物对和探针,确定扩增条件,优化组分浓度,建立HGF mRNA实时FQ-PCR检测体系,并定量检测47例淋巴瘤患者[霍奇金病(HD)11例,非霍奇金淋巴瘤(NHL)36例;治疗后,获缓解34例,未缓解13例]和19例非肿瘤患者的淋巴组织标本中HGFmRNA表达.同时,用受试者工作特征(ROC)曲线法,评价其在淋巴瘤诊断中的敏感度和特异度.结果 本研究构建的HGF mRNA定量标准和实时FQ-PCR检测体系的标准曲线斜率为-3.513,相关系数为0.999,扩增效率达92.6
作者:岑东;吕建新;裴仁治;涂植光;余晓林;文阳安
来源:中华检验医学杂志 2008 年 31卷 4期
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