目的 基于Ion Torrent半导体测序技术建立常染色体显性多囊肾患者PKD1基因致病突变检测方法并评价其临床应用价值.方法 遗传病分子诊断.收集2013年7月至2014年8月在南京市妇幼保健院就诊的多囊肾患者5例,提取外周血DNA,采用9个长链PCR反应特异性扩增PKD1基因全部编码区,PCR产物混合后进行酶切,经模板制备、乳液PCR和磁珠颗粒富集,应用Ion Torrent个体化基因组测序仪进行PKD1基因测序,对发现的致病突变通过Sanger测序验证.结果 应用Ion Torrent半导体测序技术检测到4例患者存在PKD1基因致病突变,分别为外显子12微小缺失突变(c.2966_2970delCGGCG),外显子15微小缺失突变(c.5014_5015delAG),内含子23剪接位点突变(c.8972-2A＞ G),外显子36错义突变(c.10675G＞ A).结论 基于长链PCR技术和Ion Torrent 半导体测序技术,建立了常染色体显性多囊肾病基因诊断方法,该方法能够特异性检测PKD1基因致病突变,具有较高的临床应用价值.
作者：马定远；胡平；罗春玉；张菁菁；成建；王玉国；蒋涛；许争峰
来源：中华检验医学杂志 2015 年 38卷 1期
