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目的 构建慢性髓系白血病(CML)28的树突状细胞(DC)核酸疫苗,观察其对淋巴细胞白血病的抗肿瘤效应.方法 从pcDNA3.1HisA-CML28中克隆出6×His及CML28的cDNA全长,酶切后连接至真核表达载体pIRES2-增强型绿色荧光蛋白(EGFP);从健康人外周血中分离外周血单个核细胞(PBMC),在白介素4(IL-4)和粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)条件下诱导分化为DC;用电穿孔法将重组质粒pIRES2-EGFP-CML28导入DC,Western blot检测His-CML28融合蛋白的表达,荧光显微镜检测EGFP的表达;用表达CML28的DC刺激同基因型淋巴细胞作为效应细胞,淋巴细胞白血病患者的PBMC作为靶细胞,以乳酸脱氢酶(LDH)释放实验测定其抗肿瘤效应.结果 重组质粒pIRES2-EGFP-CML28导入DC后,能正确表达His-CML28融合蛋白及EGFP.经表达CML28的DC刺激的同基因型淋巴细胞能特异性杀伤淋巴细胞白血病患者的PBMC,杀伤率为68.3

作者:张路;张东华;周红升;戴敏;汪涯雅;张丽

来源:中华肿瘤杂志 2008 年 30卷 1期

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作者:
张路;张东华;周红升;戴敏;汪涯雅;张丽
来源:
中华肿瘤杂志 2008 年 30卷 1期
标签:
CML28 树突状细胞 核酸疫苗 CML28 Dendritic cell Nucleic acid vaccine
目的 构建慢性髓系白血病(CML)28的树突状细胞(DC)核酸疫苗,观察其对淋巴细胞白血病的抗肿瘤效应.方法 从pcDNA3.1HisA-CML28中克隆出6×His及CML28的cDNA全长,酶切后连接至真核表达载体pIRES2-增强型绿色荧光蛋白(EGFP);从健康人外周血中分离外周血单个核细胞(PBMC),在白介素4(IL-4)和粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)条件下诱导分化为DC;用电穿孔法将重组质粒pIRES2-EGFP-CML28导入DC,Western blot检测His-CML28融合蛋白的表达,荧光显微镜检测EGFP的表达;用表达CML28的DC刺激同基因型淋巴细胞作为效应细胞,淋巴细胞白血病患者的PBMC作为靶细胞,以乳酸脱氢酶(LDH)释放实验测定其抗肿瘤效应.结果 重组质粒pIRES2-EGFP-CML28导入DC后,能正确表达His-CML28融合蛋白及EGFP.经表达CML28的DC刺激的同基因型淋巴细胞能特异性杀伤淋巴细胞白血病患者的PBMC,杀伤率为68.3

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