目的 探讨miR-140对结肠癌RKO细胞迁移和侵袭能力的影响及其调控机制.方法 将miR-140模拟物、miR-140特异性抑制物和Smad3小干扰RNA(siRNA)等分别通过脂质体转染至细胞,应用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测细胞中miR-140和Smad3 mRNA的表达,应用Western blot检测Smad3蛋白的表达.采用细胞划痕实验和Transwell小室模型检测miR-140上调、miR-140下调和Smad3下调对RKO细胞迁移和侵袭能力的影响.结果 Western blot结果显示,上调miR-140后,miR-140组中Smad3蛋白的相对表达水平为0.04±0.01,低于空白对照组(0.47±0.02)和阴性对照组(0.52 ±0.06,均P<0.05).real-time PCR检测结果显示,miR-140组中Smad3 mRNA表达水平为1.11 ±0.13,与阴性对照组(1.00±0.06)比较,差异无统计学意义(P>0.05).细胞划痕实验显示,miR-140转染细胞的迁移能力均低于空白对照组和阴性对照组,而与Smad3 siRNA组比较,迁移能力无明显改变.Transwell小室迁移实验显示,miR-140组的穿膜细胞数为76.2±4.4,低于空白对照组(267.1±4.9)和阴性对照组(336.1±5.7,均P<0.05),而与Smad3 siRNA组(83.5±7.3)比较,差异无统计学意义(P>0.05).Transwell小室侵袭实验显示,miR-140组的穿膜细胞数为109.5±7.4,低于空白对照组(403.1±5.1)和阴性对
作者:赵文月;邹佳芮;王波;范盼红;毛俊;李嘉芝;刘涵;肖晶;马威
来源:中华肿瘤杂志 2014 年 36卷 10期