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探讨miR?144对神经母细胞瘤细胞增殖凋亡和顺铂耐药的影响及其机制.方法采用实时荧光定量PCR法检测神经母细胞瘤细胞SH?SY5Y、SK?N?SH和人脐静脉内皮细胞HUVEC中miR?144、MYCN mRNA 的表达.将 miR?NC、 miR?144 mimics、 si?NC、 si?MYCN、 miR?144 mimics+pcDNA和miR?144 mimics+pcDNA?MYCN转染至SH?SY5Y细胞,四甲基偶氮唑蓝法检测细胞的半数抑制率(IC50)和增殖情况,Western blot检测细胞中MYCN、p21、Cyclin D1、Bax和Bcl?2蛋白的表达,流式细胞术检测细胞的凋亡,双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性.结果 与人脐静脉内皮细胞HUVEC(1.01±0.03)比较,神经母细胞瘤细胞SH?SY5Y中miR?144的表达(0.32±0.03)降低,MYCN mRNA和蛋白的表达水平(分别为2.42±0.18和1.98±0.15)升高,顺铂对SH?SY5Y细胞的IC50为9.16 μg/ml. miR?144组和miR?NC组SH?SY5Y细胞在490 nm波长处的吸光度值分别为0.30± 0.03和0.46±0.03,凋亡率分别为(26.94±2.01)

作者:刘慧娟;李桂玲;雷平冲

来源:中华肿瘤杂志 2019 年 41卷 7期

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作者:
刘慧娟;李桂玲;雷平冲
来源:
中华肿瘤杂志 2019 年 41卷 7期
标签:
miR?144 MYCN 小儿神经母细胞瘤 增殖 凋亡 耐药 MiR?144 MYCN Pediatric neuroblastoma Proliferation Apoptosis Resistance
探讨miR?144对神经母细胞瘤细胞增殖凋亡和顺铂耐药的影响及其机制.方法采用实时荧光定量PCR法检测神经母细胞瘤细胞SH?SY5Y、SK?N?SH和人脐静脉内皮细胞HUVEC中miR?144、MYCN mRNA 的表达.将 miR?NC、 miR?144 mimics、 si?NC、 si?MYCN、 miR?144 mimics+pcDNA和miR?144 mimics+pcDNA?MYCN转染至SH?SY5Y细胞,四甲基偶氮唑蓝法检测细胞的半数抑制率(IC50)和增殖情况,Western blot检测细胞中MYCN、p21、Cyclin D1、Bax和Bcl?2蛋白的表达,流式细胞术检测细胞的凋亡,双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性.结果 与人脐静脉内皮细胞HUVEC(1.01±0.03)比较,神经母细胞瘤细胞SH?SY5Y中miR?144的表达(0.32±0.03)降低,MYCN mRNA和蛋白的表达水平(分别为2.42±0.18和1.98±0.15)升高,顺铂对SH?SY5Y细胞的IC50为9.16 μg/ml. miR?144组和miR?NC组SH?SY5Y细胞在490 nm波长处的吸光度值分别为0.30± 0.03和0.46±0.03,凋亡率分别为(26.94±2.01)

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