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目的:研制可替宁单克隆抗体(单抗),并建立检测人体尿液样本中可替宁的免疫检测方法.方法:利用人工合成的可替宁牛血清白蛋白(COT-BSA)免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术筛选一种对可替宁具有高特异性和敏感性的单抗,并将该单抗用于建立间接竞争ELISA(ic-ELISA)和胶体金免疫层析试纸,检测人体尿液中可替宁的含量.结果:所研制的可替宁单抗经ic-ELISA鉴定,半数有效抑制浓度为21 ng/mL,经胶体金免疫层析试纸鉴定,截断值为100 ng/mL.所建立的ic-ELISA方法检测限为0.1 ng/mL,回收率为99.41％ ～117.98％,批间和批内变异系数分别小于等于15.31％和15.07％.所建立的胶体金免疫层析试纸稳定性和重复性检测准确率均为100％.结论:以制备的可替宁单抗为基础开发的ic-ELISA和胶体金免疫层析试纸可快速、可靠地检测人体尿液中可替宁含量,可作为环境烟草烟雾在人体内暴露程度的有效检测方法.
作者：雷雅静；周丽芳；王安行；陈枢青
来源：浙江大学学报（医学版） 2020 年 49卷 6期
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