目的 探讨低氧环境下甲状腺乳头状癌(PTC)细胞中期因子(Midkine)表达的调节机制.方法 以人PTC细胞系BCPAP和TPC1为材料,使用低氧、缺氧诱导因子-1α(HIF1-α)稳定剂DMOG刺激,使用HIF1-α小发夹RNA(HIF1-αshRNA)转染,采用Western blot法分别检测不同细胞HIF1-α、CD10与半乳糖凝集素3(gal3)蛋白表达的变化.采用双荧光素报告酶法检测HIF1-α与CD10、gal3 mRNA的靶向关系,并在公共数据库中检测HIF1-α与CD10、gal3 mRNA表达的关联.将BCPAP和TPC1为对照组、CD10的编码基因膜金属肽内切酶(MME)敲低组(转染MME shRNA)、gal3的编码基因人可溶性半乳糖凝集素3(LGALS3)敲低组(转染LGALS3 shRNA)、MME+LGALS3共敲低组(共转染MME shRNA和LGALS3 shRNA),采用Western blot法检测各组HIF1-α、CD10和gal3蛋白相对表达量,采用ELISA法检测各组Midkine水平.结果 低氧、DMOG刺激下,细胞CD10和gal3蛋白相对表达量均上升(均P＜0.01),且呈时间依赖性.转染HIF1-α后,细胞CD10和gal3蛋白相对表达量均显著下降(均P＜0.01);双荧光素报告酶实验显示,HIF1-αcDNA与CD10和gal3启动子靶向结合,增强两者的转录表达;HIF1-α与MME mRNA和LGALS3 mRNA表达的相关系数分别为0.43和0.58,均呈正相关(均P＜0.01).随缺氧时间延长,细胞中Midkine

作者：李吉；张建辉；谢中意；李君强

来源：浙江医学 2023 年 45卷 9期