[目的]研究益气固表经典方玉屏风散(Yupingfeng Powder,YPF)对BALB/c小鼠胸腺上皮细胞(thymic epithelial cells,TECs)介导的小鼠皮肤T淋巴细胞功能的影响.[方法](1)离体器官培养法研究YPF对BALB/c小鼠表皮淋巴细胞的影响及TECs在该过程中的作用.分离BALB/c小鼠皮肤组织和原代TECs细胞,设对照组(正常培养皮肤组织),YFP低、中、高剂量组(皮肤组织予25、50、100μg·mL-1 YPF处理)、TEC共培养组(TECs与皮肤组织共培养)、TEC+YPF低、中、高剂量组(TECs与皮肤组织共培养,同时分别加入25、50、100μg·mL-1 YPF处理),以上各组培养72h后以免疫组化法检测皮肤组织中CD3+、CD4+、CD8+T细胞的数量.(2)研究YPF对BALB/c小鼠胸腺细胞、脾细胞的影响及TECs在该过程中的作用.分离小鼠脾淋巴细胞和胸腺细胞,以噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法检测25、50、100μg·mL-1 YPF对脾淋巴细胞和胸腺细胞增殖的影响.再采用TECs分别与脾淋巴细胞或胸腺细胞共培养,以对照培养液或上述浓度YPF处理48h,流式细胞术检测脾淋巴细胞和胸腺细胞中CD3+、CD4+和CD8+T细胞数量及CD4+/CD8+细胞比值的变化,酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测脾淋巴细胞和胸腺细胞中γ-干扰素(interferon-γ,IFN-
作者:马丽;沈佳曼;黄芬;郭文琴;高建莉
来源:浙江中医药大学学报 2020 年 44卷 10期