目的:利用基因转染和RNA干涉(RNA interference,RNAi)技术在肺腺癌SPC-A1细胞株中分别建立2种Livin异构体的基因沉默体系,旨在进一步体外观察两种异构体基因沉默诱导SPC-A1细胞凋亡效应.方法:构建Livin两种异构体小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)表达载体;以电穿孔法转染SPC-A1细胞,经G418筛选获得稳定转染的细胞克隆;通过半定量RT-PCR和Western blot验证Livin异构体在SPC A1细胞中的基因沉默效率,建立高效Livin异构体基因沉默体系.结果:成功获得Livin异构体siRNA表达载体,经基因转染以及G418抗性筛选,成功建立Livin异构体特异基因沉默SPC-A1细胞克隆.结论:RNAi能高效特异阻断两种Livin异构体表达,为进一步研究其不同的抗凋亡生物学功能,探讨其作为诱导肺癌细胞凋亡治疗分子靶点以及提高肺癌细胞放化疗敏感性打下基础.
作者：孙建国；廖荣霞；陈正堂；王志新；张青；胡义德；王东林；粟永萍
来源：肿瘤 2006 年 26卷 2期
