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目的:探讨肝细胞核因子 4γ(hepatocyte nuclear factor 4 gamma,HNF4G)对于胆囊癌细胞增殖、迁移、细胞周期和凋亡等的影响及相关作用机制. 方法:分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测胆囊癌GBC-SD、NOZ和ZJU-0430细胞中HNF4G mRNA和蛋白的表达水平.采用慢病毒感染的方法在GBC-SD、NOZ和ZJU-0430细胞中构建HNF4G基因沉默或过表达的稳转细胞株.随后,分别采用CCK-8法和平板克隆形成实验检测HNF4G基因沉默或过表达对胆囊癌细胞增殖能力的影响,Transwell小室实验检测对胆囊癌细胞迁移能力的影响,FCM法检测对细胞周期和细胞凋亡的影响.最后,再用蛋白质印迹法检测改变HNF4G基因表达水平对细胞周期相关蛋白Cyclin A2和CyclinB1、凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2、上皮-间充质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、vimentin、Snail 和 Slug,以及 ErbB2/PI3K/AKT 信号通路中 ErbB2 和磷酸化AKT的表达水平的影响. 结果:实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测结果表明,NOZ细胞中HNF4G mRNA及蛋白的表达水平均明显低于GBC-SD及ZJU-0430细胞(P均<0.001).蛋白质印迹法验证结果证明,沉默HNF4G及过表达的细胞株构建成功.过表达HNF4G后能够增强GBC-SD、NOZ和ZJU-0430细胞的增殖及迁移能力(P均<0.001),促进细胞由S期向G2/

作者:杨峻峰;杜丽文;叶舰;刘建生

来源:肿瘤 2023 年 43卷 11期

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作者:
杨峻峰;杜丽文;叶舰;刘建生
来源:
肿瘤 2023 年 43卷 11期
标签:
胆囊癌 HNF4G 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移 Gallbladder cancer HNF4G Cell proliferation Apoptosis Migration
目的:探讨肝细胞核因子 4γ(hepatocyte nuclear factor 4 gamma,HNF4G)对于胆囊癌细胞增殖、迁移、细胞周期和凋亡等的影响及相关作用机制. 方法:分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测胆囊癌GBC-SD、NOZ和ZJU-0430细胞中HNF4G mRNA和蛋白的表达水平.采用慢病毒感染的方法在GBC-SD、NOZ和ZJU-0430细胞中构建HNF4G基因沉默或过表达的稳转细胞株.随后,分别采用CCK-8法和平板克隆形成实验检测HNF4G基因沉默或过表达对胆囊癌细胞增殖能力的影响,Transwell小室实验检测对胆囊癌细胞迁移能力的影响,FCM法检测对细胞周期和细胞凋亡的影响.最后,再用蛋白质印迹法检测改变HNF4G基因表达水平对细胞周期相关蛋白Cyclin A2和CyclinB1、凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2、上皮-间充质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、vimentin、Snail 和 Slug,以及 ErbB2/PI3K/AKT 信号通路中 ErbB2 和磷酸化AKT的表达水平的影响. 结果:实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测结果表明,NOZ细胞中HNF4G mRNA及蛋白的表达水平均明显低于GBC-SD及ZJU-0430细胞(P均<0.001).蛋白质印迹法验证结果证明,沉默HNF4G及过表达的细胞株构建成功.过表达HNF4G后能够增强GBC-SD、NOZ和ZJU-0430细胞的增殖及迁移能力(P均<0.001),促进细胞由S期向G2/

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