目的 构建hTFRT启动子调控的HSV-TK基因重组腺病毒载体系统,观察Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用.方法 将穿梭质粒pSU-Tp-TK与腺病毒骨架质粒pBHGE3共转导至HEK293细胞,利用细胞内同源重组法构建出hTERT启动子调控的携带TK基因的复制缺陷型腺病毒Ad-hTERTp-HSV-TK载体系统;将不同感染复数(MOI-1、10、100、1000)的重组腺病毒Ad-hTERTp-HSV-TK感染肝癌细胞HepG2及正常肝细胞L-02,加入不同浓度的GCV(0、1、10、100、1000 μg/ml),MTT法检测细胞活性.结果 HEK293细胞出现病毒空斑,提取病毒DNA,经PCR鉴定正确后扩增、纯化,滴度为1.5×1010pfu/ml;MTT法检测到Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV能靶向杀死肝癌细胞HepG2,且细胞存活率随着病毒滴度和GCV浓度的增加而降低.结论 该实验构建的Ad-hTERTp-HSV-TK载体系统,可靶向抑制肝癌细胞HepG2,面对正常肝细胞L-02几乎无影响.
作者：刘燕；邓志华；杨长青；刘京龙；贾静；郭素雅；杨强
来源：肿瘤研究与临床 2009 年 21卷 1期
