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目的 观察线粒体融合蛋白2(MFN2)对前列腺癌细胞生长的影响及其分子作用机制.方法 以含有绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体(Lenti-GFP)作为对照,用含有MFN2编码序列的慢病毒载体(Lenti-MFN2)感染前列腺癌细胞株DU-145和LNCaP.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测感染后细胞中MFN2 mRNA及蛋白的表达情况;四甲基偶氮唑盐(MTT)法和集落形成实验检测细胞活力和增殖能力的变化;流式细胞术检测细胞周期分布;Western blot检测感染后细胞中Ras、p-Raf、p-Erk1/2蛋白表达水平.结果 Lenti-MFN2组DU-145和LNCaP细胞中MFN2 mRNA表达量分别为2.79±0.91、3.87±1.06,高于Lenti-GFP组的1.02±0.27和1.13±0.59,差异均有统计学意义(t=3.726,P=0.010;t=5.209,P=0.002).与Lenti-GFP组相比,Lenti-MFN2组MFN2蛋白表达上调.Lenti-MFN2组DU-145和LNCaP细胞形成的集落数分别为(147.42±32.91)个、(130.26±62.47)个,低于Lenti-GFP组的(255.46±50.91)个、(238.10±49.77)个,差异均有统计学意义(t=3.565,P=0.012;t=2.700,P=0.036).Lenti-MFN2组细胞周期被阻滞在G0/G1期,Ras、p-Raf、p-Erk1/2蛋白表达降低.结论 MFN2可抑制前列腺癌细胞的增殖能力,其机制可能是通过抑制Ras-Raf1-Erk1/2信号通路蛋白的活化.

作者:黄耿;姜卫东;毛青;桂定文

来源:肿瘤研究与临床 2018 年 30卷 4期

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作者:
黄耿;姜卫东;毛青;桂定文
来源:
肿瘤研究与临床 2018 年 30卷 4期
标签:
前列腺肿瘤 线粒体融合蛋白2 细胞周期 细胞增殖 Prostate neoplasms Mitofusion 2 Cell cycle Proliferation
目的 观察线粒体融合蛋白2(MFN2)对前列腺癌细胞生长的影响及其分子作用机制.方法 以含有绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体(Lenti-GFP)作为对照,用含有MFN2编码序列的慢病毒载体(Lenti-MFN2)感染前列腺癌细胞株DU-145和LNCaP.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测感染后细胞中MFN2 mRNA及蛋白的表达情况;四甲基偶氮唑盐(MTT)法和集落形成实验检测细胞活力和增殖能力的变化;流式细胞术检测细胞周期分布;Western blot检测感染后细胞中Ras、p-Raf、p-Erk1/2蛋白表达水平.结果 Lenti-MFN2组DU-145和LNCaP细胞中MFN2 mRNA表达量分别为2.79±0.91、3.87±1.06,高于Lenti-GFP组的1.02±0.27和1.13±0.59,差异均有统计学意义(t=3.726,P=0.010;t=5.209,P=0.002).与Lenti-GFP组相比,Lenti-MFN2组MFN2蛋白表达上调.Lenti-MFN2组DU-145和LNCaP细胞形成的集落数分别为(147.42±32.91)个、(130.26±62.47)个,低于Lenti-GFP组的(255.46±50.91)个、(238.10±49.77)个,差异均有统计学意义(t=3.565,P=0.012;t=2.700,P=0.036).Lenti-MFN2组细胞周期被阻滞在G0/G1期,Ras、p-Raf、p-Erk1/2蛋白表达降低.结论 MFN2可抑制前列腺癌细胞的增殖能力,其机制可能是通过抑制Ras-Raf1-Erk1/2信号通路蛋白的活化.

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