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目的:探讨乳腺癌间质干细胞(BC-MSC)对乳腺癌MCF-7细胞增殖与迁移能力的影响及相关机制。方法:取乳腺癌患者术后切除癌组织和癌旁组织及健康人骨髓标本,采用组织贴壁法,加入成骨、成脂诱导液诱导分化,分离培养BC-MSC、乳腺癌旁间质干细胞(BCN-MSC)和健康人骨髓间质干细胞(BM-MSC),流式细胞术检测其表面标志。收集BC-MSC、BCN-MSC与健康人BM-MSC培养48 h的上清液,分别用于培养MCF-7细胞,分别为BC-MSC组、BCN-MSC组、BM-MSC组,对照组为常规培养的MCF-7细胞。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组MCF-7细胞的增殖能力,平板克隆实验检测MCF-7细胞的克隆形成能力,Transwell实验检测MCF-7细胞的迁移能力,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测MCF-7细胞白细胞介素(IL)6及上皮间质转化(EMT)相关基因(E-cadherin、vimentin、snail)mRNA的相对表达水平,蛋白质印迹法检测MCF-7细胞p-STAT3、E-cadherin、vimentin、snail蛋白的表达,Luminex液态芯片技术检测不同间质干细胞(MSC)培养上清中细胞因子水平。将IL-6中和抗体加入BC-MSC培养上清中,用上清培养MCF-7细胞 (BC-MSC+IL-6中和抗体组),检测MCF-7细胞增殖与迁移能力及相关基因、蛋白表达的变化。结果:成功分离BC-MSC、BCN-MSC、B

作者:周颖;徐会涛;张欢欢;张楚;郑萍;杨晋

来源:肿瘤研究与临床 2023 年 35卷 11期

知识库介绍

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作者:
周颖;徐会涛;张欢欢;张楚;郑萍;杨晋
来源:
肿瘤研究与临床 2023 年 35卷 11期
标签:
乳腺肿瘤 间质干细胞 STAT3转录因子 白细胞介素6 细胞增殖 细胞迁移 上皮-间质转化 Breast neoplasma Mesenchymal stem cells STAT3 transcription factor Interleukin-6 Cell proliferation Cell migration Epithelial-mesenchymal transition
目的:探讨乳腺癌间质干细胞(BC-MSC)对乳腺癌MCF-7细胞增殖与迁移能力的影响及相关机制。方法:取乳腺癌患者术后切除癌组织和癌旁组织及健康人骨髓标本,采用组织贴壁法,加入成骨、成脂诱导液诱导分化,分离培养BC-MSC、乳腺癌旁间质干细胞(BCN-MSC)和健康人骨髓间质干细胞(BM-MSC),流式细胞术检测其表面标志。收集BC-MSC、BCN-MSC与健康人BM-MSC培养48 h的上清液,分别用于培养MCF-7细胞,分别为BC-MSC组、BCN-MSC组、BM-MSC组,对照组为常规培养的MCF-7细胞。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组MCF-7细胞的增殖能力,平板克隆实验检测MCF-7细胞的克隆形成能力,Transwell实验检测MCF-7细胞的迁移能力,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测MCF-7细胞白细胞介素(IL)6及上皮间质转化(EMT)相关基因(E-cadherin、vimentin、snail)mRNA的相对表达水平,蛋白质印迹法检测MCF-7细胞p-STAT3、E-cadherin、vimentin、snail蛋白的表达,Luminex液态芯片技术检测不同间质干细胞(MSC)培养上清中细胞因子水平。将IL-6中和抗体加入BC-MSC培养上清中,用上清培养MCF-7细胞 (BC-MSC+IL-6中和抗体组),检测MCF-7细胞增殖与迁移能力及相关基因、蛋白表达的变化。结果:成功分离BC-MSC、BCN-MSC、B

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