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目的 探讨去甲斑蝥素对体外人源性肾小管细胞株(HK-2)上皮细胞间质转分化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)以及信号蛋白Smad2/3的影响.方法 体外培养HK-2细胞,分为对照组、TGF-β1组和去甲斑蝥素组(NCTD组).对照组为无血清DMEM培养,TGF-β1组为TGF-β1 5 ng·mL-1诱导,NCTD组为不同浓度NCTD(0.5、1.0、2.5 μg·mL-1)与TGF-β1(5 ng·mL-1共同作用,各组作用时间48 h.使用半定量RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)与Smad2、Smad3 mRNA表达;采用Western blot检测α-SMA、E-cadherin、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白质表达.结果 与对照组相比,TGF-β1组α-SMAmRNA及其蛋白表达明显上调(P<0.05),E-cadherinmRNA及其蛋白表达显著下调(P<0.05);与TGF-β1组相比,NCTD干预组α-SMA mRNA及其蛋白表达明显下调(P<0.05),而E-cadherin mRNA及其蛋白表达显著上调(P<0.05),且均呈剂量依赖性.与对照组相比,TGF-β1组Smad2、Smad3 mRNA和Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达上调(P<0.05);与TGF-β1组比较,NCTD干预组Smad2、Smad3 mRNA和Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达下调(P<0.05),具有剂量依赖关系.结论 去甲斑蝥素具有抑制肾小管上皮细胞EMT的作用,该作用可能与其下调信号蛋白Smad2/3的表达有关

作者:孙岩;刘伏友;孙林;凌光辉;李瑛;刘健;袁曙光;刘虹;张东山;夏运成;唐文彬

来源:中南药学 2010 年 8卷 3期

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孙岩;刘伏友;孙林;凌光辉;李瑛;刘健;袁曙光;刘虹;张东山;夏运成;唐文彬
来源:
中南药学 2010 年 8卷 3期
标签:
去甲斑蝥素 上皮间质转分化 转化生长因子-β1 Smad2/3
目的 探讨去甲斑蝥素对体外人源性肾小管细胞株(HK-2)上皮细胞间质转分化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)以及信号蛋白Smad2/3的影响.方法 体外培养HK-2细胞,分为对照组、TGF-β1组和去甲斑蝥素组(NCTD组).对照组为无血清DMEM培养,TGF-β1组为TGF-β1 5 ng·mL-1诱导,NCTD组为不同浓度NCTD(0.5、1.0、2.5 μg·mL-1)与TGF-β1(5 ng·mL-1共同作用,各组作用时间48 h.使用半定量RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)与Smad2、Smad3 mRNA表达;采用Western blot检测α-SMA、E-cadherin、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白质表达.结果 与对照组相比,TGF-β1组α-SMAmRNA及其蛋白表达明显上调(P<0.05),E-cadherinmRNA及其蛋白表达显著下调(P<0.05);与TGF-β1组相比,NCTD干预组α-SMA mRNA及其蛋白表达明显下调(P<0.05),而E-cadherin mRNA及其蛋白表达显著上调(P<0.05),且均呈剂量依赖性.与对照组相比,TGF-β1组Smad2、Smad3 mRNA和Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达上调(P<0.05);与TGF-β1组比较,NCTD干预组Smad2、Smad3 mRNA和Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达下调(P<0.05),具有剂量依赖关系.结论 去甲斑蝥素具有抑制肾小管上皮细胞EMT的作用,该作用可能与其下调信号蛋白Smad2/3的表达有关

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