目的 探讨注射用丹参多酚酸(SAFI)对氧糖剥夺损伤人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的保护作用及其机制.方法 采用氧糖剥夺(OGD)方法构建体外SH-SY5Y细胞缺氧损伤模型,通过CCK-8法检测缺氧6、8、10h后SH-SY5Y细胞的存活率,评估细胞损伤程度;采用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色比较各组细胞的增殖能力;采用Western blot法和免疫荧光标记法检测丝裂原活化蛋白激酶的激酶(MEK1/2)、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)表达水平的变化.结果 SH-SY5Y细胞缺氧6、8、10h后,细胞存活率分别为(64.76±0.10)%、(62.94±6.06)%、(60.90±1.33)%;与模型组相比给予SAFI后细胞生存率明显升高.EdU染色结果显示,与正常组比较,模型组SH-SY5Y细胞中EdU阳性细胞数减少(P<0.001);与模型组比较,给予SAFI后SH-SY5Y细胞中EdU阳性细胞数明显增加(P<0.001).Western blot和免疫荧光实验结果显示,与模型组相比,给予SAFI后SH-SY5Y细胞内MEK1/2和ERK1/2蛋白磷酸化水平明显升高(P<0.01).结论 注射用丹参多酚酸对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y缺氧损伤具有保护作用,其机制可能与激活Ras/Raf/MEK/ERK信号通路,调节MEK1/2和ERK1/2蛋白磷酸化水平相关.
作者:陈璐;聂永伟;张燕欣;姚宇晴;万梅绪;李德坤;鞠爱春
来源:中南药学 2023 年 21卷 6期