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海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)是海藻糖合成途径中的一个关键酶,近些年来受到广泛关注,以往的研究多数集中于细菌和真菌等,而对植物体内TPS基因的研究较少.为此,我们首先通过RT-PCR(reverse tran#22;scrip#23;tion PCR)克隆得到了拟南芥的TPS基因,进而将其构建到原核高效表达载体pET30a(+)上并在大肠杆菌 BL21中进行高效诱导表达.在确认该基因能够在体外正常表达之后 ,将其构建到植物表达载体上并转入烟草体内,通过实时荧光定量PCR检测,证明在转基因个体中目的基因已经在受体基因组上完成整合 ,并且在其中的2个个体中实现了正常转录.在对目标个体进行海藻糖含量的测定以及抗逆性实验后发现 ,S5个体具有良好的表现,其体内海藻糖的含量明显高于其它个体,并具有较强的耐受盐胁迫的能力.
作者：郭蓓；胡磊；何欣；陈雪梅；蒋湘宁
来源：植物学通报 2008 年 25卷 1期
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