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以万寿菊(Tagetes erecta)里程碑·黄色的小叶为外植体,采用农杆菌介导法探究抗生素浓度、菌株类型、菌液浓度、侵染时间、共培养时间、乙酰丁香酮浓度和抗褐化剂种类对万寿菊遗传转化效率的影响.结果表明,头孢霉素(Cef)和硫酸卡那霉素(Kan)的适宜浓度分别为100 mg·L-1和10 mg·L-1;EHA105菌株的稳定转化效率最高;菌液浓度OD600=0.1、侵染5分钟及共培养1天为最佳侵染条件.此外,在侵染过程中添加100 μmol·L-1乙酰丁香酮(AS)和筛选培养基中添加0.2g·L-1聚乙烯吡咯烷酮(PVP)均能提高出芽率.经GUS染色、PCR检测以及Southern blot检测证明转化成功,转化效率达到4%左右.研究结果为万寿菊基因功能研究和转基因育种奠定了基础.

作者:余晓敏;王亚琴;刘雨菡;易庆平;程文翰;朱钰;段枫;张莉雪;何燕红

来源:植物学报 2023 年 58卷 5期

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余晓敏;王亚琴;刘雨菡;易庆平;程文翰;朱钰;段枫;张莉雪;何燕红
来源:
植物学报 2023 年 58卷 5期
标签:
根癌农杆菌 遗传转化 小叶 万寿菊 Agrobacterium tumefaciens genetic transformation leaflet marigold
以万寿菊(Tagetes erecta)里程碑·黄色的小叶为外植体,采用农杆菌介导法探究抗生素浓度、菌株类型、菌液浓度、侵染时间、共培养时间、乙酰丁香酮浓度和抗褐化剂种类对万寿菊遗传转化效率的影响.结果表明,头孢霉素(Cef)和硫酸卡那霉素(Kan)的适宜浓度分别为100 mg·L-1和10 mg·L-1;EHA105菌株的稳定转化效率最高;菌液浓度OD600=0.1、侵染5分钟及共培养1天为最佳侵染条件.此外,在侵染过程中添加100 μmol·L-1乙酰丁香酮(AS)和筛选培养基中添加0.2g·L-1聚乙烯吡咯烷酮(PVP)均能提高出芽率.经GUS染色、PCR检测以及Southern blot检测证明转化成功,转化效率达到4%左右.研究结果为万寿菊基因功能研究和转基因育种奠定了基础.

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