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目的:究南蛇藤提取物对过表达miR-144的人胃癌AGS和HGC-27细胞上皮间质转化(EMT)的影响.方法:利用改良型慢病毒小RNA表达载体,构建两株过表达miR-144的人胃癌AGS和HGC-27细胞.MTT法分析不同浓度(20、40、80、160、320 μg/mL)南蛇藤提取物对人胃癌AGS/miR-144+和HGC-27/miR-144+细胞增殖的影响.qRT-PCR法定量检测胃癌细胞高表达miR-I44时哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达.对数生长期细胞经200 μg/mL南蛇藤提取物处理24 h后,Transwell迁移实验考察南蛇藤提取物对人胃癌AGS/miR-144+或HGC-27/miR-144+细胞迁移能力的影响.Western blot检测南蛇藤提取物对EMT主要相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vim-entin)表达和mTOR信号转导通路的影响.结果:南蛇藤提取物显著抑制人胃癌AGS/miR-144+和HGC-27/miR-144+细胞的增殖,其作用呈浓度依赖性.南蛇藤提取物处理24 h后,AGS/miR-144+和HGC-27/miR-144+细胞的迁移能力显著受到抑制,细胞中E-cadherin蛋白表达显著升高,同时N-cadherin、Vimentin、mTOR、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、4EBP1、p-4EBP1蛋白表达均显著减低(P<0.05~P<0.001).结论:南蛇藤提取物协同miR-144靶向mTOR抑制胃癌细胞的上皮间质转化进程,其分子机制是通过PI3K/Akt/mTOR信号转导通路发挥作用.

作者:李雅娟;戴小军;钱亚云

来源:中药材 2021 年 44卷 12期

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作者:
李雅娟;戴小军;钱亚云
来源:
中药材 2021 年 44卷 12期
标签:
南蛇藤 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 胃癌上皮间质转化
目的:究南蛇藤提取物对过表达miR-144的人胃癌AGS和HGC-27细胞上皮间质转化(EMT)的影响.方法:利用改良型慢病毒小RNA表达载体,构建两株过表达miR-144的人胃癌AGS和HGC-27细胞.MTT法分析不同浓度(20、40、80、160、320 μg/mL)南蛇藤提取物对人胃癌AGS/miR-144+和HGC-27/miR-144+细胞增殖的影响.qRT-PCR法定量检测胃癌细胞高表达miR-I44时哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达.对数生长期细胞经200 μg/mL南蛇藤提取物处理24 h后,Transwell迁移实验考察南蛇藤提取物对人胃癌AGS/miR-144+或HGC-27/miR-144+细胞迁移能力的影响.Western blot检测南蛇藤提取物对EMT主要相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vim-entin)表达和mTOR信号转导通路的影响.结果:南蛇藤提取物显著抑制人胃癌AGS/miR-144+和HGC-27/miR-144+细胞的增殖,其作用呈浓度依赖性.南蛇藤提取物处理24 h后,AGS/miR-144+和HGC-27/miR-144+细胞的迁移能力显著受到抑制,细胞中E-cadherin蛋白表达显著升高,同时N-cadherin、Vimentin、mTOR、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、4EBP1、p-4EBP1蛋白表达均显著减低(P<0.05~P<0.001).结论:南蛇藤提取物协同miR-144靶向mTOR抑制胃癌细胞的上皮间质转化进程,其分子机制是通过PI3K/Akt/mTOR信号转导通路发挥作用.

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