目的 探讨红细胞生成素(rHuEPO)对人肾小管上皮细胞(HKC)上皮-间充质细胞转化(EMT)的作用及其与该细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达变化的关系.方法 体外培养HKC,以未处理的HKC为阴性对照,以8ng/ml的转化生长因子-β1(TGF-β1)处理的HKC为阳性对照,以不同浓度(0.1、1.0、10、50、100 IU/ml)的rHuEPO与8ng/ml的TGF-β1共同处理HKC,或在不同时间(-24、0、12、24、36 h)用同一浓度rHuEPO(100 IU/ml)对8ng/ml的TGF-β1处理的HKC进行干预.应用RT-PCR方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和VEGFmRNA转录水平,应用免疫印迹方法检测α-SMA、E钙黏蛋白以及VEGF的蛋白表达水平.结果 rHuEPO以剂量和时间依赖的方式抑制TGF-β1诱导的HKC α-SMA mRNA和蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),保护性上调TGF-β1抑制的HKC细胞E钙黏蛋白的表达(P<0.05或P<0.01);同时上调TGF-β1抑制的HKC细胞VEGF mRNA和蛋白的表达(P<0.05或P<0.01).结论 rHuEPO对TGF-β1诱导的EMT具有一定的抑制作用,并具剂量一时间依赖性;该作用可能与rHuEPO上调肾小管上皮细胞VEGF的表达有关.
作者:赵班;吴华;郑法雷
来源:北京医学 2010 年 32卷 4期