目的:探讨细胞周期蛋白依赖性蛋白样激酶1(CDKL1)基因沉默对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和转移的影响,并阐明其可能的作用机制.方法:选择乳腺癌MCF-7细胞作为研究对象,采用小干扰RNA技术(siRNA)沉默CDKL1基因表达.采用 1 μmol·L-1 磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)抑制剂BpV或10 μmol·L-1 蛋白激酶B(Akt)激动剂SC79进行干预.取对数生长期MCF-7细胞,分为空白对照组(MCF-7细胞不作任何处理)、转染对照(siRNA-NC)组(MCF-7细胞转染siRNA-NC质粒)、siRNA-CDKL1 组(MCF-7 细胞转染 siRNA-CDKL1 质粒)、siRNA-CDKL1+ PTEN抑制剂BpV(siRNA-CDKL1+BpV)组(转染 siRNA-CDKL1 的 MCF-7 细 胞,再 采 用1 μmol·L-1 PTEN抑制剂 BpV处理 2 h)和 siRNA-CDKL1+Akt激动剂 SC79(siRNA-CDKL1+ SC79)组(转染siRNA CDKL1的MCF-7细胞,再采用10 μmol·L-1 Akt激动剂SC79处理2 h).采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测各组乳腺癌MCF-7细胞中CDKL1 mRNA和蛋白表达水平,CCK-8法检测各组乳腺癌MCF-7细胞增殖活性,EdU法检测各组乳腺癌MCF-7细胞中EdU阳性细胞率,细胞划痕愈合实验检测各组乳腺癌MCF-7细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测各组乳腺癌MCF-7细胞的迁移和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组乳腺癌MC
作者:赵月生;李祖彬;刘海鸥;陶昆麟;赵齐海;李娜
来源:吉林大学学报(医学版) 2023 年 49卷 5期