目的 沉默乙型肝炎病毒(HBV) PS1反式激活蛋白2基因(PS1TP2)对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响.方法 荧光定量PCR (RT-PCR)用于检测PS1TP2基因在不同肝细胞系中基础表达水平.将PS1TP2小干扰RNA(siRNA PS1TP2)及对应的阴性对照小干扰RNA(siNC)作为干扰组和对照组分别瞬时转染至HepG2细胞中,培养48 h后,应用CCK-8试剂盒检测两组细胞的增殖活性水平;AnnexinV/7-AAD流式细胞术检测两组细胞凋亡程度;RT-PCR检测两组细胞中PS1TP2、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)基因mRNA表达水平;Western blot检测两组细胞中Bcl-2、Bax、人腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、雷帕霉素靶蛋白(m-TOR)蛋白水平并计算Bcl-2与Bax的比例.结果 PS1TP2基因在肝癌细胞HepG2中的表达水平明显高于正常肝细胞L02.干扰组HepG2细胞的增殖速率明显慢于对照组.与对照组相比,干扰组的HepG2细胞中Annexin V+细胞数明显升高(P＜0.05),HepG2细胞中Bcl-2 mRNA表达量明显下降(P＜0.05),Bax mRNA表达量明显上升(P＜0.05);同样在干扰组的HepG2细胞中Bcl-2、m-TOR蛋白水平明显下降(P＜0.05),而Bax、AMPK蛋白水平则明显升高(P＜0.05).结论 干扰掉PS1TP2基因可经过线粒体途径促进HepG2细胞凋亡,可能是通过活化AMPK-m-TOR途径而抑制其增殖.

作者：鞠蔚华；李钦；韩铭；刘顺爱；吴君；成军；梁跃东

来源：重庆医学 2019 年 48卷 12期