目的 探讨调控Rab32蛋白表达对小鼠AML12细胞内脂质代谢的影响.方法 常规培养AML12细胞,通过转染FCD-EYFP-Rab32慢病毒表达载体构建Rab32过表达细胞系(过表达组) ,利用CRISPR/Cas9基因敲除技术构建Rab32敲除细胞系(敲除组) ,正常细胞设为对照组.Western blot检测各组细胞中Rab32蛋白表达水平;尼罗红染色后,激光共聚焦显微镜观测各组细胞内的脂滴数量和面积;定量试剂盒检测各组细胞内甘油三酯及总胆固醇水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平.结果 与对照组比较,过表达组AML12细胞中Rab32蛋白表达水平显著上调,而Rab32敲除组细胞中Rab32蛋白表达水平显著下调(P＜ 0.01);过表达组AML12细胞内脂滴数量[过表达组vs对照组: (21.91 ±14.32) vs (33.89 ± 17.31) ,P＜ 0.01]及面积[过表达组vs对照组: (16.82 ± 14.37) μm2 vs (22.27 ±14.10) μm2,P＜ 0.01]显著减少,每毫克蛋白甘油三酯[过表达组vs对照组: (104.03 ± 12.28) nmol vs(130.94 ± 4.21) nmol,P＜ 0.01]及胆固醇水平[过表达组vs对照组: (46.92 ± 1.26) μg vs (81.11 ±0.65) μg,P＜ 0.01]显著降低;而Rab32敲除组细胞内脂滴数量[(58.23 ± 42.28) ]及面积[(53.31 ±36.33) μm2]较对照组显著增加(P＜ 0.01) ,其每毫克蛋白甘油三酯[(159.03 ± 8.85

作者：周围；马莉；万瑛；李福祥

来源：第三军医大学学报 2018 年 40卷 11期