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目的构建携带反义bcl-2的重组腺病毒并观察其对BT325细胞生长和凋亡的影响.方法利用细胞内同源重组的方法构建携带反义bcl-2的重组腺病毒,利用反转录PCR和免疫组化法检测反义bcl-2在细胞内的表达及细胞Bcl-2蛋白表达的变化,用MTT法和集落形成试验观察重组腺病毒对细胞生长和集落形成能力的影响,用电镜观察、DNA片段化分析和流式细胞仪技术检测细胞的凋亡.结果成功构建了携带反义bcl-2的重组腺病毒Ad-abcl-2,滴度达到6.5×107 nfu.L-1;反转录PCR表明反义bcl-2在BT325细胞内有效转录 ,免疫组化检测到细胞Bcl-2蛋白表达水平明显下降;重组腺病毒感染BT325细胞可以显著抑制细胞的生长,6 d生长抑制率可达66
作者：王刚；王玉芝；杨安钢；王成济
来源：第四军医大学学报 2000 年 21卷 12期
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