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目的:构建反义BTEB2重组腺病毒载体,以研究BTEB2反义RNA对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及动脉再狭窄的影响. 方法:从培养的大鼠VSMC中提取总RNA,通过RT-PCR制备BTEB2 cDNA,将BTEB2 cDNA反向连接至腺病毒穿梭质粒pDC315中,构建重组穿梭质粒pDC315 ASBTEB2, 将其与腺病毒基因组质粒pBHGlox ΔE1,3Cre共转染293细胞获得重组腺病毒,采用PCR方法对其进行鉴定;用重组腺病毒感染VSMC,通过RT-PCR检测BTEB2反义RNA在VSMC中的表达. 结果:在病变293细胞的冻融上清中含有反义BTEB2重组腺病毒, 其滴度为5×109 ml.VSMC被重组腺病毒感染后,可检测到BTEB2反义RNA的表达. 结论:成功构建了反义BTEB2重组腺病毒载体;重组腺病毒可在VSMC中表达BTEB2反义RNA,为进一步研究BTEB2反义RNA对VSMC增殖及动脉再狭窄的影响奠定了基础.
作者：李德；何国祥；唐波
来源：医学研究生学报 2004 年 17卷 5期
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