目的研究已构建的编码结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)H37Ra株Ag85B成熟蛋白基因的真核表达质粒pTB30m的表达和免疫原性. 方法以电穿孔法将pTB30m转染CHO细胞,RT-PCR法检测转染细胞中Ag85B特异的mRNA的表达. 将pTB30m质粒肌注免疫BALB/c和C57BL/6小鼠,ELISA法检测基因免疫的体液免疫应答效果. 分离免疫小鼠的脾淋巴细胞,体外用抗原再刺激,生物学方法检测IFNγ产生水平和MTT法检测淋巴细胞增殖. 结果 RT-PCR检测证实pTB30m可在CHO细胞中表达. pTB30m免疫小鼠可引起较高水平的Ag85B特异性的抗体应答. 免疫小鼠的脾淋巴细胞,体外用抗原再刺激,淋巴细胞增殖显著,BALB/c和C57BL/6小鼠IFNγ的量分别达到1360 ng*L-1和1965 ng*L-1 ,而生理盐水和空质粒对照组均低于80 ng*L-1. 结论应进一步研究pTB30m作为TB的基因疫苗用于TB的防治的效果.
作者：范雄林；徐志凯；李元；薛莹；张芳琳；李别虎；白光春
来源：第四军医大学学报 2001 年 22卷 14期
