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目的构建含FasL基因的腺病毒载体,转染肾癌GRC-1细胞株,观察FasL基因对GRC-1细胞株的影响. 方法以腺病毒作载体,把FasL基因克隆入腺病毒载体,构建成含FasL基因的转基因载体并酶切鉴定,用脂质体包裹法把含FasL基因的腺病毒载体转染GRC-1细胞株,用RT-PCR方法证实转染后有无FasL基因表达,采用电镜观察GRC-1细胞形态学变化. 结果酶切鉴定证实含FasL基因的转基因载体构建成功;RT-PCR显示转染后GRC-1细胞株FasL基因表达水平显著高于未转染细胞株(P<0.01);肾癌细胞株GRC-1转染FasL基因72 h后,在光镜下可见细胞体积缩小,生长不良,染色质浓缩,密度增高,胞核中出现颗粒样物质,电镜下可见凋亡小体. 结论成功构建了FasL基因的转基因载体;转染FasL基因可诱导肾癌GRC-1细胞凋亡.

作者:刘贺亮;崔大祥;王禾;陈宝琦;邵国兴;陈勇

来源:第四军医大学学报 2002 年 23卷 11期

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作者:
刘贺亮;崔大祥;王禾;陈宝琦;邵国兴;陈勇
来源:
第四军医大学学报 2002 年 23卷 11期
标签:
FasL基因 载体构建 细胞凋亡 细胞株
目的构建含FasL基因的腺病毒载体,转染肾癌GRC-1细胞株,观察FasL基因对GRC-1细胞株的影响. 方法以腺病毒作载体,把FasL基因克隆入腺病毒载体,构建成含FasL基因的转基因载体并酶切鉴定,用脂质体包裹法把含FasL基因的腺病毒载体转染GRC-1细胞株,用RT-PCR方法证实转染后有无FasL基因表达,采用电镜观察GRC-1细胞形态学变化. 结果酶切鉴定证实含FasL基因的转基因载体构建成功;RT-PCR显示转染后GRC-1细胞株FasL基因表达水平显著高于未转染细胞株(P<0.01);肾癌细胞株GRC-1转染FasL基因72 h后,在光镜下可见细胞体积缩小,生长不良,染色质浓缩,密度增高,胞核中出现颗粒样物质,电镜下可见凋亡小体. 结论成功构建了FasL基因的转基因载体;转染FasL基因可诱导肾癌GRC-1细胞凋亡.

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