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目的 构建结核分枝杆菌(M.tb)rv3873基因原核表达载体并进行表达.方法 用聚合酶链反应(PCR)扩增MTB rv3873基因,并克隆入pGEM(R)-T Easy质粒.测序正确后,再亚克隆入pET30a(+)质粒,构建pET30a(+):rv3873重组体.结果 以重组体分别转化DH5α和BL21(DE3)菌后,经0.4mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,pET30a(+):rv3873表达出相对分子质量为47 000左右的重组蛋白.SDS-PAGE分析显示,IPTG诱导4 h重组蛋白的表达量最高.表达蛋白以包涵体形式存在于胞质中,表达量占全菌蛋白质的50

作者:陈曦;张宗德;古淑香;贾红彦;刘忠泉;邢爱英;李自慧;杜博平;黄海荣;马玙

来源:国际呼吸杂志 2007 年 27卷 17期

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陈曦;张宗德;古淑香;贾红彦;刘忠泉;邢爱英;李自慧;杜博平;黄海荣;马玙
来源:
国际呼吸杂志 2007 年 27卷 17期
标签:
结核分枝杆菌 rv3873基因 Rv3873重组蛋白
目的 构建结核分枝杆菌(M.tb)rv3873基因原核表达载体并进行表达.方法 用聚合酶链反应(PCR)扩增MTB rv3873基因,并克隆入pGEM(R)-T Easy质粒.测序正确后,再亚克隆入pET30a(+)质粒,构建pET30a(+):rv3873重组体.结果 以重组体分别转化DH5α和BL21(DE3)菌后,经0.4mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,pET30a(+):rv3873表达出相对分子质量为47 000左右的重组蛋白.SDS-PAGE分析显示,IPTG诱导4 h重组蛋白的表达量最高.表达蛋白以包涵体形式存在于胞质中,表达量占全菌蛋白质的50

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