目的 探讨敲低微RNA (miR)-30a-5p表达对裸鼠荷人脑胶质瘤细胞U87移植瘤生长的抑制作用及其机制.方法 建立裸鼠皮下荷U87人脑胶质瘤模型,采用随机数字表法将其分为对照组、无义序列治疗组和miR-30a-5p反义寡聚核苷酸(AS-miR-30a-5p)治疗组(每组8只).分别给予相应治疗,隔日测量肿瘤大小以评估其疗效.治疗结束后处死动物,剥离肿瘤组织,提取RNA和蛋白,采用实时PCR方法检测治疗后miR-30a-5p表达水平,采用石蜡切片苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色及Western blot检测,评价治疗后肿瘤组织形态以及增殖、凋亡等生物学性状等相关指标的变化,包括隔蛋白7(SEPT7)、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(cyclin D1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)以及凋亡相关因子P53、bcl-2、caspase3等;应用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡.结果 AS-miR-30a-5p治疗组肿瘤生长速度及体积明显小于对照组与无义序列组,差异有统计学意义(F=7.167,P<0.05);其miR-30a-5p表达下调为对照组的0.297±0.051;肿瘤细胞恶性生物学表型相关蛋白PCNA、cyclin D1等表达明显下调,P53、SEPT7、caspase3等肿瘤生长抑制因子表达上调;细胞凋亡数明显增加.结论 miR-30a-5p为靶点的治疗能有效抑制异种移植U87人脑胶质瘤生长,肿瘤恶性表型有明显逆转,可作为人脑
作者:孙即奎;贾志凡;浦佩玉;王广秀;张安玲;杨卫东
来源:国际肿瘤学杂志 2013 年 40卷 2期