目的:筛选不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)的短发夹RNA (shRNA)慢病毒载体感染宫颈癌细胞株Hela细胞的稳定细胞株.方法:利用hnRNPA2/B1 shRNA慢病毒载体转染Hela细胞,采用嘌呤霉素抗性方法筛选稳定转染的Hela细胞系;将Hela细胞分为空白组(Hela)、阴性组(NC-shRNA)、干扰组1(shRNA1)、干扰组2(shRNA2)、干扰组3(shRNA3)和干扰组4(shRNA4),实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测各组细胞hnRNPA2/B1 mRNA表达水平,Western blot检测hnRNPA2/B1蛋白表达水平,筛选干扰沉默效率最高的细胞作为稳定沉默hnRNPA2/B1基因的稳转株.结果:经筛选获得稳定转染的宫颈癌Hela细胞株,干扰组2,干扰组3和干扰组4与空白组比较,hnRNPA2/B1基因和蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P＜0.05),其中干扰组4沉默效率最高.结论:成功构建hnRNPA2/B1 shRNA慢病毒载体感染的Hela稳定细胞株.
作者：刘瑶；石祥；方文
来源：贵州医科大学学报 2016 年 41卷 6期
