目的 基于TMT蛋白质组学和网络药理学探讨常春藤皂苷元(Hed)抑制宫颈癌SiHa细胞线粒体自噬的作用机制.方法 首先,利用TMT蛋白质组学技术鉴定Hed干预的差异蛋白并进行KEGG富集分析;然后,通过自拟的网络关联算法确定与线粒体自噬关联度最高的信号转导通路并构建关联网络;随后,通过TOPSIS及k核分解法确定潜在关键靶点及靶网络;最后,通过JC-1荧光染色及Western印迹等方法验证Hed抑制线粒体自噬的分子机制.结果 TMT蛋白质组学鉴定了1270个差异蛋白,包括655个上调和615个下调蛋白.关联分析结果显示HIF-1信号通路与线粒体自噬密切相关.TOPSIS及k核分解显示Hed可能通过调控以HIF-1α、Src、Akt、Stat3这4个潜在关键靶点为主的靶网络以抑制线粒体自噬.JC-1结果表明Hed能诱导线粒体膜电位下降.Western印迹结果表明Hed能降低HIF-1α、Src、Akt的表达,增加Stat3的表达,同时能增加p62的水平及提高LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比例.结论 Hed可能通过调控以HIF-1α、Src、Akt、Stat3为主的靶网络阻滞自噬效应部分,从而抑制宫颈癌细胞的晚期线粒体自噬.
作者：孙浩；王丹
来源：中国药理学与毒理学杂志 2023 年 37卷 z1期
