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目的 研究谷氨酰胺酶 1(glutaminase1,GLS1)对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响.方法 体外培养人胃黏膜上皮细胞GES1 和胃癌细胞N87、MKN28、BGC826 和BGC803.设计合成靶向GLS1 的siRNA片段(si-GLS1-1#和si-GLS1-2#),分别转染N87 和BGC823 细胞,以无意义siRNA为对照(si-con).采用qRT-PCR检测细胞中GLS1 mRNA表达,CCK8 和克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测细胞中 GLS1 蛋白和上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达.异种移植瘤实验评估干扰GLS1 对胃癌细胞体内生长的影响.结果 胃癌细胞中GLS1 mRNA和蛋白均呈高表达(P<0.05).与si-con组比较,si-GLS1-1#和si-GLS1-2#组细胞中GLS1 mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05).细胞功能实验结果显示,与si-con组比较,si-GLS1-1#和si-GLS1-2#组细胞的增殖活力、克隆形成能力及迁移、侵袭能力均被抑制(P<0.05),而细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中 N-cadherin 和Vimentin蛋白表达明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达明显升高(P<0.05).异种移植瘤实验结果显示,与si-con组比较,si-GLS1-1#和si-GLS1-2#组移植瘤体积和重量均明显减小(

作者:徐慧鲜;刘振锋

来源:河北医药 2023 年 45卷 13期

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作者:
徐慧鲜;刘振锋
来源:
河北医药 2023 年 45卷 13期
标签:
胃癌 谷氨酰胺酶1 增殖 凋亡 迁移 侵袭 上皮间充质转化 gastric cancer glutaminase 1 proliferation apoptosis migration invasion epithelial-mesenchymal transition
目的 研究谷氨酰胺酶 1(glutaminase1,GLS1)对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响.方法 体外培养人胃黏膜上皮细胞GES1 和胃癌细胞N87、MKN28、BGC826 和BGC803.设计合成靶向GLS1 的siRNA片段(si-GLS1-1#和si-GLS1-2#),分别转染N87 和BGC823 细胞,以无意义siRNA为对照(si-con).采用qRT-PCR检测细胞中GLS1 mRNA表达,CCK8 和克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测细胞中 GLS1 蛋白和上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达.异种移植瘤实验评估干扰GLS1 对胃癌细胞体内生长的影响.结果 胃癌细胞中GLS1 mRNA和蛋白均呈高表达(P<0.05).与si-con组比较,si-GLS1-1#和si-GLS1-2#组细胞中GLS1 mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05).细胞功能实验结果显示,与si-con组比较,si-GLS1-1#和si-GLS1-2#组细胞的增殖活力、克隆形成能力及迁移、侵袭能力均被抑制(P<0.05),而细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中 N-cadherin 和Vimentin蛋白表达明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达明显升高(P<0.05).异种移植瘤实验结果显示,与si-con组比较,si-GLS1-1#和si-GLS1-2#组移植瘤体积和重量均明显减小(

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