目的:探讨姜黄素通过微小RNA-181a(miR-181a)调控锌指蛋白Kruppel样因子6(KLF6)表达对骨肉瘤细胞生长的影响.方法:体外培养骨肉瘤细胞系U2OS细胞,将U2OS细胞分为对照组(不作处理)、姜黄素组(终浓度分别为 5,10,20μmol/L姜黄素)、miR-181a 阴性对照(miR-NC)组、miR-181a模拟物(miR-181amimics)组、姜黄素(20μmol/L)+NC组、姜黄素(20 μmol/L)+miR-181a mimics组,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法与平板克隆形成实验检测各组U2OS细胞增殖情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-181a与KLF6 mRNA表达情况;蛋白印迹分析法检测各组U2OS细胞KLF6、细胞周期蛋白B1(CyclinB1)、CyclinD1表达变化;双荧光素酶报告实验验证miR-181a与KLF6的靶向关系.结果:与对照组相比,随着姜黄素浓度升高,U2OS细胞存活率、细胞平板克隆形成率、CyclinD1、CyclinB1蛋白、miR-181a表达水平逐渐降低,KLF6表达水平逐渐升高,并呈浓度依赖性(P＜0.05);经 targetscan 数据库预测显示,miR-181a 与 KLF6 mRNA 3'UTR 区有结合位点,与 KLF6-3'UTR-WT+miR-181a NC组比较,KLF6-3'UTR-WT+miR-181amimics组荧光素酶活性降低(P＜0.05);与对照组及miR-NC组相比,miR-181a mimics组U2OS细胞存活率、细胞平板克隆形成率、Cyclin D1、Cyclin B1蛋白表达水平显

作者：白洋；黄纬；张菲斐；李向辉；金杰

来源：武汉大学学报（医学版） 2023 年 44卷 3期