目的 探讨体外分离培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)和平滑肌祖细胞(SPC)的方法,并初步比较不同培养条件下大鼠SPC对VSMC表型转化的影响.方法 原代培养细胞,通过蛋白印迹实验(Western Blot)检测平滑肌α-肌动蛋白(α-SMA)鉴定VSMC,SPC培养后经流式细胞术鉴定分选贴壁细胞CD14和CD105双阳性表达细胞继续培养为SPC,通过SPC与VSMC共培养以及利用Transwell装置条件培养、空白对照3种条件干预后,应用Western Blot法分别测定三组骨桥蛋白水平变化,以检测并初步比较不同条件下SPC对VSMC表型转化的影响.结果 两种细胞分别原代培养后,Western Blot鉴定VSMC,结果显示α-SMA表达呈阳性；鉴定SPC免疫细胞化学染色α-SMA表达呈阳性,且流式细胞仪分析显示CD14和CD105呈双阳性表达.与空白对照相比,两种细胞共同培养和条件培养时VSMC表达骨桥蛋白水平明显升高,共同培养较条件培养骨桥蛋白水平升高效果更为明显.结论 SPC对VSMC的表型由收缩型向合成型转变具有一定作用,SPC通过直接作用与旁分泌作用不同程度地增强了VSMC的表型转化；对比发现,两细胞直接接触培养时VSMC表型转化的影响更为明显(P＜0.05).
作者：谢晓晨；李飞；包楠迪；左惠荣；张荣庆；郭文怡
来源：中华保健医学杂志 2013 年 15卷 5期
