[目的]本研究旨在探明梨小食心虫Grapholita molesta在不同发育阶段、成虫不同组织以及不同浓度的3种杀虫剂处理后成虫中稳定表达的内参基因,为后续对梨小食心虫目的基因表达的研究奠定基础.[方法]基于梨小食心虫转录组数据筛选10个候选内参基因(β-actin,18S rRNA,β-tubulin,EF-1α,RPL13,RPL32,RSPL40,UBC7,α-tubulin和RPS20);通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定候选内参基因在梨小食心虫不同发育阶段(卵、1-5龄幼虫、蛹和成虫)、成虫不同组织(头、前肠、中肠、后肠、脂肪体、马氏管、精巢和卵巢)以及不同浓度的3种杀虫剂(阿维菌素:19.819,72.897 和 179.663 μg/mL;吡虫啉:17.638,163.323 和 762.986 μg/mL 以及高效氯氟氰菊酯:33.791,96.123和198.282 μg/mL)通过玻璃管药膜法处理后成虫中的表达量;利用geNorm,NormFinder,△Ct,BestKeeper和RefFinder对10个候选内参基因的表达稳定性进行评价.选择梨小食心虫细胞色素P450基因CYP354A32进行验证.[结果]结合qRT-PCR结果和软件评价结果表明,梨小食心虫不同发育阶段内参基因表达稳定性从高到低依次为β-tubulin,18S rRNA,EF-1α,RPL13,β-actin,RPS20,UBC7,RPL32,α-tubulin和RSPL40;成虫不同组织内参基因表达稳定性从高到低依次为 UBC7,β-tubulin,β-

作者：韩慧；庞钦玮；刘晓庆；梁宝莲；高玲玲；马瑞燕；郭艳琼

来源：昆虫学报 2023 年 66卷 4期