目的 验证在PCR反应体系中加入牛血清清蛋白(BSA)可否提高小鼠骨肉瘤模型floxed Rb1基因杂合子和纯合子的检出率与准确率.方法 以小鼠骨肉瘤模型子代小鼠基因组DNA为模板,进行Rb1基因的PCR基因分型.对在PCR反应体系中添加适量浓度(0.16 mg/mL)的BSA与不加BSA的PCR基因分型结果相比较.PCR引物序列涵盖Rb1基因外显子19两侧或3'端的LoxP序列.结果 反应体系中添加BSA后,可成功获得PCR扩增条带:单一650 bp或247 bp(野生型)、单一700bp或295 bp(floxed Rb1基因纯合型)以及650 bp和700 bp(或247 bp和295 bp)混合条带(floxed Rb1基因杂合型),而反应体系中未加BSA的则无PCR扩增条带产生.结论 BSA可显著提高floxed Rb1基因的扩增效率,增加了该基因杂合子和纯合子的检出率并排除了假阴性结果,对于难以扩增的靶基因序列的PCR基因分型具有借鉴意义.
作者：谷俊侠；乔龙威；梁玉婷；冉德园；吕耀娟；郑其平
来源：临床检验杂志 2013 年 31卷 11期
