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目的:探讨再程序化星形胶质细胞制备并在体外诱导其分化为神经元。方法在体外培养大鼠脑皮质来源星形胶质细胞(astrocyte),随后将提纯、鉴定过的第三代星形胶质细胞接种于12孔培养皿中,并分为A、B、C 3组。其中 A 组为带有绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体介导 neurogenin2(Ngn2)基因转染的星形胶质细胞,制备再程序化星形胶质细胞;B 组为带有 GFP 基因的空载体病毒转染的星形胶质细胞;C 组为未进行慢病毒介导基因转染的星形胶质细胞;转基因1周后加入含细胞生长因子诱导培养基诱导分化15 d,光镜下观察各组细胞形态变化以及定向神经元分化的差异。结果A 组星形胶质细胞转基因后再诱导15 d,很大部分细胞形态呈神经元样改变,胞体呈梭形或椭圆形,有多个突起伸出且突起较长,表达神经元核蛋白(NeuN)、神经丝蛋白(NF)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的比例大大提高,相比 B 组及 C 组,差异有统计学意义(均 P <0.05);而B 组与 C 组神经元分化比例的差异无统计学意义(P >0.05)。结论慢病毒介导 Ngn2基因体外转染星形胶质细胞可制备出再程序化星形胶质细胞,诱导后具有更强的向神经元定向分化能力。

作者:钱腾达;张斌;刘彦;李立新

来源:临床神经外科杂志 2015 年 4期

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作者:
钱腾达;张斌;刘彦;李立新
来源:
临床神经外科杂志 2015 年 4期
标签:
neurogenin2 星形胶质细胞 神经元分化 再程序化 neuogenin2 astrocyte reprogammed neuronal differentiation
目的:探讨再程序化星形胶质细胞制备并在体外诱导其分化为神经元。方法在体外培养大鼠脑皮质来源星形胶质细胞(astrocyte),随后将提纯、鉴定过的第三代星形胶质细胞接种于12孔培养皿中,并分为A、B、C 3组。其中 A 组为带有绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体介导 neurogenin2(Ngn2)基因转染的星形胶质细胞,制备再程序化星形胶质细胞;B 组为带有 GFP 基因的空载体病毒转染的星形胶质细胞;C 组为未进行慢病毒介导基因转染的星形胶质细胞;转基因1周后加入含细胞生长因子诱导培养基诱导分化15 d,光镜下观察各组细胞形态变化以及定向神经元分化的差异。结果A 组星形胶质细胞转基因后再诱导15 d,很大部分细胞形态呈神经元样改变,胞体呈梭形或椭圆形,有多个突起伸出且突起较长,表达神经元核蛋白(NeuN)、神经丝蛋白(NF)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的比例大大提高,相比 B 组及 C 组,差异有统计学意义(均 P <0.05);而B 组与 C 组神经元分化比例的差异无统计学意义(P >0.05)。结论慢病毒介导 Ngn2基因体外转染星形胶质细胞可制备出再程序化星形胶质细胞,诱导后具有更强的向神经元定向分化能力。

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