目的 探究异甘草素对H37Ra感染的巨噬细胞中结核杆菌的抑制作用及其涉及的机制.方法 以5、10、25、50、75、100 μmol/L异甘草素处理RAW264.7细胞24、48、72 h,MTT检测细胞活力.细胞被H37Ra感染6 h后:(1)利用10、25或50μM异甘草素处理细胞24 h;(2)利用50 μg/mL雷帕霉素处理细胞2 h;(3)利用50 μmol/L异甘草素和30 μg/mL EGF[epidermal growth factor,一种 PI3K(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase)/AKT 激活剂]或 5mM 3MA(一种自噬抑制剂)共处理细胞24 h.利用计数法测量细菌菌落总数;利用Western blotting检测PI3 K/AKT/mTOR通路蛋白和自噬标志蛋白表达;利用免疫荧光检测LC3(Microtubule-associated protein 1 light chain 3)蛋白表达.结果 不同浓度异甘草素处理不影响细胞活力.异甘草素或雷帕霉素处理感染后细胞显著减少细菌菌落总数,激活PI3K/AKT/mTOR通路,促进LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白相对表达量,增强LC3荧光强度,并抑制P62蛋白相对表达量.EGF处理逆转异甘草素诱导的自噬激活.3MA处理逆转异甘草素诱导的细菌菌落数下降.结论 异甘草素通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路,激活自噬,抑制感染H37Ra的巨噬细胞中结核杆菌生长.
作者：李彬
来源：辽宁中医杂志 2024 年 51卷 4期
