目的 探讨咪康唑调控肺癌细胞外泌体分泌的机制,及其抑制肿瘤效应.方法 以人肺癌细胞A549、H460和人正常肺上皮细胞BEAS-2B为模型,采用电镜观察和外泌体定量试剂盒对外泌体进行定性和定量分析.实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测EBP蛋白在不同细胞中的表达以及咪康唑和siRNA的靶向效应;CCK-8法检测A549细胞的增殖活性.结果 肺癌细胞A549外泌体数量为120×107 mL-1,H460细胞的外泌体数量为100×107 mL-1,都大于正常肺上皮细胞的外泌体数量(72×107 mL-1),差异有统计学意义(t=13.460,P=0.001;t=19.210,P=0.009).采用不同浓度咪康唑处理后,能够减少两种肺癌细胞的外泌体分泌数量,并且呈现典型的浓度依赖性,5、10和20 μmol/L咪康唑处理后A549细胞分泌的外泌体数量分别为(127.77±7.72)×107 mL-1、(105.38±2.33)×107 mL-1和(72.26±14.48)×107 mL-1,均少于对照组(0 μmol/L咪康唑)的(139.79±7.70)×107 mL-1,差异有统计学意义,P值分别为0.049,0.005和<0.001;H460细胞的外泌体数量分别为(95.83±6.31)×107 mL-1、(79.63±8.65)×107 mL-1 和(63.91±11.05)×107 mL-1,均少于对照组的(109.29±6.38)×107mL-1,差异具有统计学意义,P值分别为0.046、0.006和<0.001.咪康唑能够降低肺癌细胞EBP蛋白相对含量
作者:窦学军;王志远
来源:中华肿瘤防治杂志 2021 年 28卷 14期