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目的 构建结核分枝杆菌Rv2031c基因的真核表达载体,并在P815细胞中高效表达.方法 应用PCR扩增Rv2031c基因,克隆人原核表达载体后进行测序,测序正确的序列克隆人真核表达载体pcDNA3.1(-);重组质粒pcDNA-Rv2031c转染P815真核细胞;以RT-PCR方法 检测结核分枝杆菌Rv2031c在真核细胞内mRNA表达,以间接免疫荧光技术检测目的 蛋白的表达.结果 Rv2031c基因成功克隆人真核表达载体pcDNA3.1(-),并可在P815细胞高效表达.结论 成功构建了真核表达重组质粒pcDNA-Rv2031c,为进一步研究Rv2031c的功能奠定了坚实基础.

作者:尚淑琴;王丽梅;张薇;曾令城;陈宝忠

来源:热带病与寄生虫学 2012 年 10卷 4期

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作者:
尚淑琴;王丽梅;张薇;曾令城;陈宝忠
来源:
热带病与寄生虫学 2012 年 10卷 4期
标签:
结核分枝杆菌 基因 真核 表达
目的 构建结核分枝杆菌Rv2031c基因的真核表达载体,并在P815细胞中高效表达.方法 应用PCR扩增Rv2031c基因,克隆人原核表达载体后进行测序,测序正确的序列克隆人真核表达载体pcDNA3.1(-);重组质粒pcDNA-Rv2031c转染P815真核细胞;以RT-PCR方法 检测结核分枝杆菌Rv2031c在真核细胞内mRNA表达,以间接免疫荧光技术检测目的 蛋白的表达.结果 Rv2031c基因成功克隆人真核表达载体pcDNA3.1(-),并可在P815细胞高效表达.结论 成功构建了真核表达重组质粒pcDNA-Rv2031c,为进一步研究Rv2031c的功能奠定了坚实基础.

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