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目的 对少突胶质前体细胞(OPCs)的分离、培养及传代方法进行改良,并建立少突胶质谱系限制细胞的体外分化模型,以模拟体内OPCs的发育过程.方法 通过非特异性差异黏附法与A2B5-IgM抗体免疫筛选法结合,从胚胎大鼠脊髓来源的细胞悬液中分离、纯化OPCs,用含成纤维细胞生长因子-2和血小板源性生长因子的培养液作扩增培养;再以三碘甲状腺氨酸和神经营养因子-3诱导OPCs分化,最终分化为成熟的少突胶质细胞(OLs).OPCs及其分化细胞的特性通过形态学观察和免疫化学染色法鉴定.结果 95%以上的细胞具有双极或三极突起的典型OPCs形态,并表达A2B5;在一定的培养条件下,OPCs可持续扩增和反复传代,且扩增的OPCs仍能维持其特有的形态和自我增殖的特性;进入分化进程的细胞将依次表达04、Ol、受体反应蛋白及髓鞘碱性蛋白等特异性分化抗原.结论 分离的OPCs在形态、增殖以及分化格局等方面均与存在于胚胎脑区的02A的体细胞(体内OPCs)相类似.

作者:李莹;富赛里;马政文

来源:上海交通大学学报(医学版) 2011 年 31卷 10期

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作者:
李莹;富赛里;马政文
来源:
上海交通大学学报(医学版) 2011 年 31卷 10期
标签:
少突胶质前体细胞 杂交瘤细胞株 成纤维细胞生长因子-2 血小板源性生长因子 细胞培养
目的 对少突胶质前体细胞(OPCs)的分离、培养及传代方法进行改良,并建立少突胶质谱系限制细胞的体外分化模型,以模拟体内OPCs的发育过程.方法 通过非特异性差异黏附法与A2B5-IgM抗体免疫筛选法结合,从胚胎大鼠脊髓来源的细胞悬液中分离、纯化OPCs,用含成纤维细胞生长因子-2和血小板源性生长因子的培养液作扩增培养;再以三碘甲状腺氨酸和神经营养因子-3诱导OPCs分化,最终分化为成熟的少突胶质细胞(OLs).OPCs及其分化细胞的特性通过形态学观察和免疫化学染色法鉴定.结果 95%以上的细胞具有双极或三极突起的典型OPCs形态,并表达A2B5;在一定的培养条件下,OPCs可持续扩增和反复传代,且扩增的OPCs仍能维持其特有的形态和自我增殖的特性;进入分化进程的细胞将依次表达04、Ol、受体反应蛋白及髓鞘碱性蛋白等特异性分化抗原.结论 分离的OPCs在形态、增殖以及分化格局等方面均与存在于胚胎脑区的02A的体细胞(体内OPCs)相类似.

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