目的·探讨长链非编码 RNA(long non-coding RNA,lncRNA)GK-IT1 通过调控醛缩酶 A(aldolase A,ALDOA)对非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)细胞A549及H358恶性进展的影响.方法·应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测42对NSCLC组织和癌旁组织以及NSCLC细胞系中GK-IT1的表达.荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)实验检测GK-IT1在A549及H358中的亚细胞定位.RNA免疫共沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)检测 GK-IT1 与 ALDOA 的相互作用关系.以 2条 GK-IT1 的小干扰 RNA序列(Si-GK-IT1#1 和Si-GK-IT1#2)及空白对照(Si-NC)转染A549及H358细胞,再以Si-GK-IT1#2和ALDOA过表达质粒共转染上述细胞系.设置Si-NC组、Si-GK-IT1#1及Si-GK-IT1#2组,采用CCK-8及EdU实验检测细胞增殖能力,Transwell侵袭实验与细胞划痕实验检测细胞侵袭能力及迁移能力.Western blotting检测各实验组内波形蛋白(vimentin)、E钙黏蛋白(E-cadherin)、N钙黏蛋白(N-cadherin)及ALDOA的表达水平.结果·与正常组织相比,NSCLC组织中GK-IT1的表达量明显升高;与正常支气管上皮细胞BEAS-2B相比,H358、A549细胞中GK-IT1的表达量明显升高(均P<0.05).FISH实验表明GK-IT1主要位于细胞质;RIP实验
作者:刘子杨;王小文;陈力
来源:上海交通大学学报(医学版) 2022 年 42卷 5期