目的 探索线粒体超氧离子(superoxides,O2-)是否参与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导的细胞外基质纤维化.方法 培养大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F),AngⅡ刺激24h后进行活细胞线粒体荧光染色(mitosox)以检测细胞内的线粒体O2-;采用酶标仪和流式细胞术检测线粒体超氧离子含量和分布;利用Real-time PCR、Westernblot及免疫荧光检测AngⅡ对细胞外基质胶原蛋白-Ⅰ (collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ)、胶原蛋白-Ⅲ(collagen-Ⅲ,Col-Ⅲ)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)表达的影响;并进一步检测NADPH氧化酶抑制剂罗布麻宁(apocynin,APO)对下游超氧离子合成以及ColⅠ、ColⅢ和FN表达的影响.结果 AngⅡ明显促进大鼠肾脏成纤维细胞O2-的生成以及细胞外基质Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和FN的表达.Apo可显著抑制AngⅡ所引起的肾成纤维细胞中O2-表达,而AngⅡ诱导的Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和FN的合成作用亦被APO阻断.结论 线粒体O2-介导了AngⅡ诱导的肾脏成纤维细胞的细胞外基质蛋白的合成,采用APO抑制O2-的表达,可使纤维化程度减轻.
作者：王均玲；余晨
来源：同济大学学报（医学版） 2016 年 37卷 3期
