目的：研究微小RNA（miR）－29c通过靶向T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（Tiam1）基因对食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞侵袭和迁移的影响。方法通过细胞划痕和transwell实验观察miR－29c过表达的ESCC细胞侵袭迁移能力的变化；通过免疫印迹法和sensor reporter 实验研究miR－29c对Tiam1的调控作用和靶标位点；在细胞“拯救”实验中通过免疫印迹法检测相关蛋白表达量的变化以及用免疫荧光－激光共聚焦显微镜观察细胞形态的改变，研究miR－29c 抑制ESCC 细胞侵袭迁移的调节机制。结果细胞划痕实验和 transwell 实验显示miR－29c能抑制ESCC细胞的侵袭迁移；通过生物信息学方法预测miR－29c的靶基因是Tiam1；免疫印迹法和sensor reporter检测结果显示miR－29c通过与Tiam13′－非翻译区（ UTR）结合降解Tiam1；细胞功能“拯救”实验的细胞划痕、免疫印迹法和免疫荧光结果显示miR－29c能抑制Tiam1的表达，导致激活态Rac1－三磷酸鸟苷（ GTP）减少，致使细胞运动状态改变，迁移能力减弱；而人工合成的针对Tiam1的特异siRNA分子siTiam1的干涉作用能“拯救”miR－29C对ESCC细胞迁移能力的抑制。结论 miR－29C通过降解Tiam1 mRNA，下调了Rac1的激活水平，导致细胞运动状态变化，从而抑制ESCC细胞的侵袭迁移。
作者：褚庆华；张婕；孙奋勇
来源：检验医学 2015 年 6期
