作为细菌分裂所必需的微管蛋白类似物,丝状温度敏感蛋白Z (filamentous temperature-sensitive protein Z,FtsZ)被认为是一个具有潜力的药物作用新靶点.为了构建高纯度的FtsZ重组蛋白分离纯化体系,探讨其酶学性质,该研究利用大肠杆菌BL21异源表达结核分枝杆菌FtsZ重组蛋白,通过Ni亲和层析柱和G-50层析柱纯化目的蛋白,采用孔雀石绿法和90°光散射法测定FtsZ重组蛋白的GTP酶活和蛋白聚集.研究结果表明:成功获得具有生物学活性的结核分枝杆菌FtsZ重组蛋白,其相对分子质量约为49 kD;该酶最适反应温度为37℃,最适pH为6.8,金属离子Mg2+和K+对FtsZ重组蛋白酶活具有促进作用,有机溶剂DMSO和Triton X-100 的体积分数分别高于0.1％和0.005％时对酶活有显著抑制作用(P＜0.05).此外,FtsZ重组蛋白在加入底物GTP诱导后,快速聚集.本实验利用基因工程技术成功获得具有生物活性的FtsZ重组蛋白,并明确了该蛋白质的酶学性质,为其进一步的研究和应用奠定了基础.
作者：代斌玲；王爱莲；高承贤；闵真真；钱朝东；田应蓉；陈建真
来源：生命科学研究 2016 年 20卷 6期
