目的:研究地龙蛋白对人增生性瘢痕细胞增殖抑制作用机制.方法:培养人增生性瘢痕成纤维细胞(HSF),将传代好的HSF细胞分为四组,分别加入地龙样品浓度为0 mg/mL(对照组)、0.3125 mg/mL(低剂量组)、0.625 mg/mL(中剂量组)、1.25 mg/mL(高剂量组).应用MTS法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR法和Western-blot法测定Cyclin D1、Caspase-3、TGF-β1的表达,Western-blot法测定Bcl-2、Mcl-2的表达.结果:地龙蛋白对HSF细胞的增殖活力有抑制作用.浓度0.625mg/mL、1.25 mg/mL样品组作用细胞48 h后凋亡率为分别为31.5%和69.2%,(P<0.01);RT-PCR显示,浓度0.625 mg/mL、1.25mg/mL样品组能够增加Caspase-3的基因表达,降低CyclinD1的基因表达,降低TGF-β1的基因表达,(P<0.01);浓度0.3125mg/mL样品组与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05).W-B方法显示,各样品组能够增加Caspase-3的蛋白表达量,降低Cy-clinD l的蛋白表达量,降低TGF-β1的蛋白表达量,(P<0.01);浓度0.625mg/mL、1.25 mg/mL样品组能够降低Bcl-2蛋白表达量,(P<0.01);浓度0.3125 mg/mL样品组Bcl-2的蛋白表达量与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05).结论:地龙蛋白诱导细胞死亡,作用机制与下调Cyclin D1的基因和蛋白表达,上调Caspase-3的基因和
作者:黄敬文;王景;安丽凤;段剑飞;代宇;高宏伟
来源:现代生物医学进展 2017 年 17卷 35期