您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览226 | 下载0

蛇毒类凝血酶是临床上防治血栓栓塞性疾病的有效药物.参照朝鲜蝮蛇(Agkistrodon caliginosus,Korean Viper)类凝血酶calobin基因序列(GenBank AccessionNo.U32937.1),将人工合成的calobin基因克隆到酵母表达载体pPICZαA,于毕赤酵母中表达,得到了分子量约为32 kD的重组calobin蛋白,经甲醇诱导培养,表达产物可获得3.5 g/L的高表达量.重组蛋白经过阴离子交换柱Q-Sepharose Fast Flow和分子筛Sephacryl-S-100凝胶过滤层析等纯化步骤进行了初步纯化.纯化后的重组calobin可以在纤维蛋白原平板上形成水解圈,经SDS-PAGE实验显示,重组蛋白能水解纤维蛋白原的Aα链,产生一条约40 kD左右的降解带.在实验中未能发现重组calobin对纤维蛋白原的凝固作用.

作者:袁盛凌;王芃;陶好霞;展德文;王艳春;王令春;刘纯杰;张兆山

来源:生物工程学报 2009 年 25卷 4期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:226 | 下载:0
作者:
袁盛凌;王芃;陶好霞;展德文;王艳春;王令春;刘纯杰;张兆山
来源:
生物工程学报 2009 年 25卷 4期
标签:
蛇毒类凝血酶 毕赤酵母 calobin 纤维蛋白原
蛇毒类凝血酶是临床上防治血栓栓塞性疾病的有效药物.参照朝鲜蝮蛇(Agkistrodon caliginosus,Korean Viper)类凝血酶calobin基因序列(GenBank AccessionNo.U32937.1),将人工合成的calobin基因克隆到酵母表达载体pPICZαA,于毕赤酵母中表达,得到了分子量约为32 kD的重组calobin蛋白,经甲醇诱导培养,表达产物可获得3.5 g/L的高表达量.重组蛋白经过阴离子交换柱Q-Sepharose Fast Flow和分子筛Sephacryl-S-100凝胶过滤层析等纯化步骤进行了初步纯化.纯化后的重组calobin可以在纤维蛋白原平板上形成水解圈,经SDS-PAGE实验显示,重组蛋白能水解纤维蛋白原的Aα链,产生一条约40 kD左右的降解带.在实验中未能发现重组calobin对纤维蛋白原的凝固作用.

Baidu
map