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天然的木质纤维素材料含有纤维素、半纤维素和木质素等成分.降解天然木质纤维素底物时,需要木质纤维素酶共同作用.近年在木质纤维素酶的相互协同作用方面的研究引起人们的关注,成为一个新的研究热点,文中使用两个不同的共表达载体pETDuet-1和pRSFDuet-1,在大肠杆菌中共表达了白蚁及其肠道微生物来源的p-葡萄糖苷酶、内切β-1,4-葡聚糖酶、漆酶和木聚糖酶这4种木质纤维素酶,经过SDS-PAGE分析得到了与理论值一致的蛋白条带,同时经过酶活验证,这4种蛋白都具有酶活性.以磷酸处理的微晶纤维素(PASC)为底物,测定了共表达酶粗酶液与单独表达酶混合液的协同作用因子,从还原糖的产量上经计算共表达的粗酶液比单独表达酶的混合液对PASC的降解协同作用提高44%;以滤纸和磷酸处理的玉米芯为底物,测定降解协同作用,分别提高了34%和20%.结果 表明,共表达酶的降解效率要高于混合的单组分酶液降解效率的总和.

作者:杜娇;姜淑喆;未建华;申玉龙;倪金凤

来源:生物工程学报 2019 年 35卷 2期

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作者:
杜娇;姜淑喆;未建华;申玉龙;倪金凤
来源:
生物工程学报 2019 年 35卷 2期
标签:
白蚁 木质纤维素酶 共表达 协同作用
天然的木质纤维素材料含有纤维素、半纤维素和木质素等成分.降解天然木质纤维素底物时,需要木质纤维素酶共同作用.近年在木质纤维素酶的相互协同作用方面的研究引起人们的关注,成为一个新的研究热点,文中使用两个不同的共表达载体pETDuet-1和pRSFDuet-1,在大肠杆菌中共表达了白蚁及其肠道微生物来源的p-葡萄糖苷酶、内切β-1,4-葡聚糖酶、漆酶和木聚糖酶这4种木质纤维素酶,经过SDS-PAGE分析得到了与理论值一致的蛋白条带,同时经过酶活验证,这4种蛋白都具有酶活性.以磷酸处理的微晶纤维素(PASC)为底物,测定了共表达酶粗酶液与单独表达酶混合液的协同作用因子,从还原糖的产量上经计算共表达的粗酶液比单独表达酶的混合液对PASC的降解协同作用提高44%;以滤纸和磷酸处理的玉米芯为底物,测定降解协同作用,分别提高了34%和20%.结果 表明,共表达酶的降解效率要高于混合的单组分酶液降解效率的总和.

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