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目的:金黄色葡萄球菌肠毒素A Asp227ala基因的克隆及表达.方法:利用错配PCR方法,从含有金黄色葡萄球菌肠毒素A(Staphylococcal enterotoxin A,SEA)基因的质粒中扩增出约720bp的DNA片段,将其克隆到表达载体7ZTS中,并转化于JM109(DE3).结果:重组质粒的测序结果表明,它含有702bp(不包括N端72bp的信号肽编码区),其核苷酸序列与文献报道完全一致,推导的氨基酸序列显示227位的天冬氨酸已突变为丙氨酸.结论:该基因所表达的蛋白为可溶性蛋白,表达量占总蛋白51.5

作者:杨立泉;吴文芳;时成波;吕安国;冯家勋;柏学亮

来源:生物技术 2003 年 13卷 5期

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作者:
杨立泉;吴文芳;时成波;吕安国;冯家勋;柏学亮
来源:
生物技术 2003 年 13卷 5期
标签:
金黄色葡萄球菌肠毒素A基因 基因突变 基因表达
目的:金黄色葡萄球菌肠毒素A Asp227ala基因的克隆及表达.方法:利用错配PCR方法,从含有金黄色葡萄球菌肠毒素A(Staphylococcal enterotoxin A,SEA)基因的质粒中扩增出约720bp的DNA片段,将其克隆到表达载体7ZTS中,并转化于JM109(DE3).结果:重组质粒的测序结果表明,它含有702bp(不包括N端72bp的信号肽编码区),其核苷酸序列与文献报道完全一致,推导的氨基酸序列显示227位的天冬氨酸已突变为丙氨酸.结论:该基因所表达的蛋白为可溶性蛋白,表达量占总蛋白51.5

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