目的:验证重组人BD3-BPI(rhBD3-BPI)是否具有内毒素中和活性,研究其在高盐环境中是否能保持抗菌活性。方法:根据内毒素标准品绘制内毒素活性标准曲线,将100μL梯度稀释的rhBD3-BPI与100μL 10 EU/mL脂多糖(LPS)混匀,37℃水浴60 min,同时设标准对照(只含10 EU/mL LPS的标准品溶液),并以无热源水作为空白对照,采用基质显色法进行鲎试验测定LPS的活性;将6×108 CFU/mL的革兰阳性和阴性标准菌株及临床分离的多药耐药菌株接种于含1 mg/mL rhBD3-BPI和0~250 mmol/L不同浓度NaCl的液体细菌培养基中,37℃培养3 h后用10 mmol/L磷酸钠按1∶1~1∶1000的比例稀释,铺LB培养基平板,37℃过夜培养,观察各平板菌落生长情况,计数并计算杀菌率。结果:在5 EU/mL的标准内毒素体系中,当rhBD3-BPI的浓度高于4μg/mL时即开始表现出一定的内毒素中和活性,当rhBD3-BPI的浓度分别为16、32μg/mL时,其内毒素中和率分别为23
作者:庹晓晔;蒋伟;李杰之;柴家科;郭希民
来源:生物技术通讯 2013 年 6期